2021年10月12日，中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所/病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室周溪團(tuán)隊(duì)與復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)教育部/衛(wèi)健委重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室陸路團(tuán)隊(duì)合作發(fā)表于《Immunity》雜志題為“Inhibition of viral suppressor of RNAi proteins by designerpeptides protects from enteroviral infection in vivo”的研究論文，首次揭示通過(guò)合理設(shè)計(jì)多肽類抑制劑，使其特異性靶向腸道病毒RNAi抑制子，能有效打破病毒VSR對(duì)RNAi的抑制，充分釋放RNAi的抗病毒免疫功能，成為RNAi免疫機(jī)制在哺乳動(dòng)物中依然存在的有力證明。由于該免疫機(jī)制在細(xì)胞與動(dòng)物體內(nèi)水平展現(xiàn)出的良好抗病毒活性，以及較高的安全性，使其臨床開(kāi)發(fā)的潛力極高。
免疫戰(zhàn)爭(zhēng)：隨時(shí)參戰(zhàn)的雙方，手段頻出的戰(zhàn)場(chǎng)
從宏觀尺度的刺、角、爪、牙，到細(xì)胞層面的吞噬、溶解、毒殺，再到分子結(jié)構(gòu)的切割、干擾、降解；從體外到體內(nèi)、細(xì)胞外到細(xì)胞內(nèi)：歡迎來(lái)到既分高下，也決生死的戰(zhàn)場(chǎng)——一場(chǎng)隨時(shí)打響的免疫戰(zhàn)爭(zhēng)。
RNAi——天然高效的抗病毒免疫機(jī)制
哺乳動(dòng)物中RNAi免疫機(jī)制的發(fā)現(xiàn)
VSR靶向多肽：藥物研發(fā)新方向
在該項(xiàng)研究中，研究團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新性地根據(jù)腸道病毒EV-A713A VSR蛋白的A1和A2螺旋序列人為設(shè)計(jì)了P1、P2兩個(gè)VSR靶向肽(VSR-targeting peptide，VTP)。通過(guò)檢測(cè)選取細(xì)胞系中EV-A71 RNA的積累狀況，表明P1和P2都以劑量依賴的方式有效抑制了病毒的復(fù)制。
之后根據(jù)實(shí)驗(yàn)效果，參照效果較優(yōu)的P2序列進(jìn)一步合成了一系列多肽，發(fā)現(xiàn)其中肽ER的D-逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)化修飾亞型 (ER-DRI) 對(duì)病毒RNA復(fù)制的抑制效果最好。為證實(shí)該系列VTP靶向并滅活EV-A71 3AVSR，解鎖RNAi的抗病毒活性，感染細(xì)胞中總RNA被提取并進(jìn)行了深度測(cè)序，結(jié)果表明被檢測(cè)到的vsiRNA的確來(lái)源于EV-A71。其中，被感染細(xì)胞內(nèi)EV-A71病毒RNA純化提取使用Qiagen及Foregene病毒總RNA提取試劑盒進(jìn)行。
同時(shí)，對(duì)發(fā)生突變?nèi)笔Я?span lang="EN-US" style="margin:0px;padding:0px;outline:0px;max-width:100%;box-sizing:border-box !important;overflow-wrap:break-word !important;">3A-VSR功能的EV-A71病毒，以及被EV-A71病毒感染的Dicer1或AGO2缺失細(xì)胞，VTP均無(wú)法發(fā)揮抗病毒作用。證明其作用機(jī)制確實(shí)是靶向3A-VSR，并依賴于RNAi通路。
為了研究ER-DRI的臨床前潛力，研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)腹腔注射熒光標(biāo)記肽，評(píng)估其在EV-A71病毒感染小鼠中的抗病毒效果。結(jié)果表明ER-DRI在小鼠體內(nèi)同樣激發(fā)了RNAi抗病毒免疫反應(yīng)，抑制了EV-A71的復(fù)制，改善了感染小鼠的臨床癥狀，并減少了感染導(dǎo)致的小鼠死亡。同時(shí)急性毒性試驗(yàn)表明，ER-DRI對(duì)小鼠的健康不存在明顯危害。
VTPs解鎖的RNAi免疫機(jī)制強(qiáng)大到足以介導(dǎo)高效的抗病毒活性，明確地證明了RNAi作為哺乳動(dòng)物抗病毒免疫的生理重要性和治療可行性。此外，該研究已經(jīng)證明了VSRs是可藥物化的靶點(diǎn)，為抗病毒治療提供了靶向 VSRs的全新策略，并且像ER-DRI這樣的多肽作為腸道病毒感染的一流VTD有相當(dāng)大的前景。
關(guān)注福際生物，持續(xù)為您帶來(lái)分子前沿信息
