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introduction
2023年3月7日，阿斯利康制藥與Ionis公司的ASO類型藥物“Eplontersen”在國(guó)內(nèi)申請(qǐng)上市，用于治療遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性。該藥于2022年初由美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）已授予孤兒藥資格（ODD）。
小核酸藥物類型及發(fā)展現(xiàn)狀
Types and Development Status of Small Nucleic Acid Drugs
自從1961年mRNA的發(fā)現(xiàn)開始，到ASO、適配體、RNAi、遞送系統(tǒng)，小核酸藥物一步步從想象走入現(xiàn)實(shí)，隱隱成為繼小分子藥物、抗體藥物外的第三大類藥物，引領(lǐng)新一輪的制藥浪潮。
小核酸藥物，即寡核苷酸藥物，是由十幾個(gè)到幾十個(gè)核苷酸串聯(lián)組成的短鏈核酸，作用于pre-mRNA或mRNA，通過干預(yù)靶標(biāo)基因表達(dá)實(shí)現(xiàn)疾病治療目的。主要包括 RNAi 藥物（siRNA、miRNA）和 反義核苷酸（ASO） 藥物，另外還有核酸適配體及其他短RNA片段類型（saRNA、sgRNA、tRNA碎片等）。
基于其靶向針對(duì)pre-mRNA或mRNA的特性，小核苷酸藥物可于RNA水平上實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病的治療，可選成藥靶點(diǎn)更多，具有以下多重優(yōu)勢(shì)：
起初，小核酸藥物的發(fā)展瓶頸在于如何避免受體體內(nèi)核酸酶的降解，成功進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部調(diào)節(jié)RNA表達(dá)水平或蛋白翻譯過程。隨著化學(xué)修飾技術(shù)的突破和GalNac遞送系統(tǒng)的出現(xiàn)，初步解決了小核酸藥物的不穩(wěn)定性和缺乏有效遞送系統(tǒng)的問題。小核酸藥物基于疾病靶點(diǎn)基因序列的主動(dòng)式、數(shù)字化設(shè)計(jì)、合成模式，極大地縮短了傳統(tǒng)藥物無法避免的篩選周期。全球相關(guān)市場(chǎng)規(guī)模自2016年起迅速增大，已由最初1千萬多美元增長(zhǎng)至2022年的37.84億美元，近三年年均增長(zhǎng)率12%以上，成為全球藥物研發(fā)領(lǐng)域的最前沿。
全球小核酸藥物市場(chǎng)規(guī)模統(tǒng)計(jì)（2016-2022，單位：億美元）
小核酸藥物研發(fā)關(guān)鍵問題及挑戰(zhàn)
Key issues and challenges in the development of small nucleic acid drugs
小核酸藥物研發(fā)過程中的不同問題需要相應(yīng)的技術(shù)加以解決。按照小核酸藥物研發(fā)流程，核心技術(shù)分為RNA設(shè)計(jì)、化學(xué)修飾、遞送、合成及制劑技術(shù)。其中最首要的核心技術(shù)在于高效準(zhǔn)確地獲得具有效的、特異性作用分子序列；最關(guān)鍵的核心技術(shù)是小核酸藥物遞送技術(shù)，增強(qiáng)分子穩(wěn)定性和靶向能力、降低給藥劑量和毒副作用。
在大量資本進(jìn)入小核酸藥物研發(fā)行業(yè)的現(xiàn)狀下，鑒于靶點(diǎn)基因序列的多樣性與復(fù)雜性，如何快速準(zhǔn)確篩選到具備藥效價(jià)值的核酸片段就成為研發(fā)初始的首要任務(wù)。小核酸藥物的靶向目標(biāo)在于細(xì)胞內(nèi)特異性RNA片段，因此對(duì)其表達(dá)水平的上調(diào)或下調(diào)存在顯著影響是藥物有效性篩選的重要指標(biāo)。
對(duì)于細(xì)胞基因表達(dá)水平上調(diào)或下調(diào)的傳統(tǒng)研究方式，需要在給藥處理后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)量級(jí)，收集細(xì)胞并純化RNA，再通過熒光定量PCR獲得CT值進(jìn)行分析比較。該過程受限于RNA純化方法及通量限制，在細(xì)胞培養(yǎng)、核酸提取過程耗費(fèi)大量時(shí)間、人力、資金，無法快速高效地獲得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。同時(shí)由于實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)相對(duì)較多，數(shù)據(jù)均一性、穩(wěn)定性無法達(dá)到精準(zhǔn)化篩選要求。
福際生物基于直接PCR/qPCR技術(shù)平臺(tái)，帶來創(chuàng)新性高效”5H”篩選解決方案——Cell Direct RT-qPCR kit，可于培養(yǎng)板原位處理細(xì)胞獲得RNA模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，節(jié)省大量操作及時(shí)間，并可適配自動(dòng)化，高效準(zhǔn)確獲得細(xì)胞GOI表達(dá)水平結(jié)果，迅速確定具備藥效價(jià)值的核酸片段！
H1
H1-高效率High Efficiency：7分鐘即可完成整板RNA模板制備（5mins裂解+2mins終止），無需大型儀器?？墒褂枚嗫顧C(jī)型的FAST擴(kuò)增程序，最快可在90分鐘內(nèi)完成篩選全流程，比傳統(tǒng)方法節(jié)約80%時(shí)間！
5min板孔原位裂解釋放RNA, 2min終止反應(yīng)
所得裂解液即可作為模板進(jìn)行后續(xù)RT-qPCR反應(yīng)
H2
H2-高精密度High Precision：可實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化操作，整板均一性好，相對(duì)傳統(tǒng)方法精密度數(shù)量級(jí)提升。
整板CT值均一性好
H3
H3 -高通量High Throughput：最大可一次性進(jìn)行384孔基因表達(dá)篩選，相對(duì)傳統(tǒng)方法提升4倍以上。
藥物處理后384孔細(xì)胞基因表達(dá)差異的擴(kuò)增曲線
H4
H4-高適應(yīng)性High adaptability：適用于懸浮細(xì)胞與貼壁細(xì)胞擴(kuò)增篩選，同時(shí)適用于超過10種常用細(xì)胞類型。試劑盒具有很低的檢測(cè)下限，10 - 106個(gè)細(xì)胞級(jí)別均能夠?qū)崿F(xiàn)準(zhǔn)確擴(kuò)增。
H1299細(xì)胞1E5數(shù)量級(jí)別,10倍梯度稀釋后CT值及擴(kuò)增曲線
檢測(cè)位點(diǎn)：Actin 60
H5
H5-高準(zhǔn)確度High Accuracy：可使用UDG防污染體系；同時(shí)RT-qPCR反應(yīng)酶抑制物耐受性極強(qiáng)，可以無視培養(yǎng)基殘留干擾，讓篩選結(jié)果更可靠。
RT-qPCR反應(yīng)抑制物耐受性，培養(yǎng)基殘留干擾對(duì)比
FG
訂購信息
貨號(hào) | 規(guī)格 | 產(chǎn)品名稱 |
DRT-01011 DRT-01012 | 200T 1000T | QuickEasy? Cell Direct RT-qPCR Kit - SYBR Green I |
DRT-01021 DRT-01022 | 200T 1000T | QuickEasy? Cell Direct RT-qPCR Kit -Taqman |
DRT-02121 | 400 T | (384-well) QuickEasy? Cell Direct RT-qPCR Kit - Taqman |
DRT-02011 | 96T | (96-well) QuickEasy? Cell Direct RT-qPCR Kit - SYBR Green I |
DRT-02021 | 96T | (96-well) QuickEasy? Cell Direct RT-qPCR Kit - Taqman |
