| 產 品 名 稱 | 血液基因組DNA 小量提取試劑盒(<1mL) Blood DNA mini Kit |
| 貨 號 | DE-05111 |
| 規(guī) 格 | 50T |
| 價 格 | ￥419.00 |
| 描 述 | 快速從抗凝全血樣本中純化獲得高質量的基因組DNA，試劑盒包含Foregene純化柱及試劑。 |
產品介紹
由于血液樣本中含有大量的紅細胞以及血小板細胞等，使得血液的處理比較麻煩，而一般方法提取到的血液基因組DNA純度不高，含量太低。本試劑盒采用全新的Foregene Protease Plus以及獨特的BL1、BL2緩沖體系，可以在短時間內完全消化抗凝血液和凝血樣本，從而最大程度上避免了DNA的降解以及獲得最大量的基因組DNA?？焖俚难禾幚硐到y(tǒng)，簡便的離心柱操作，大大簡化了血液基因組的提取，使得40min內即可得到高質量、高純度的基因組DNA。
本試劑盒離心柱采用的DNA-only硅膠膜為本公司特有新型材料，高效、特異吸附DNA，可最大限度的去除RNA、雜質蛋白、離子及細胞中其他有機化合物。獲得的DNA片段大，純度高、質量穩(wěn)定可靠，一個離心柱的最大承載量為80 μg DNA。獲得的DNA可用于酶切、PCR、Southern雜交、文庫構建等分子生物學實驗。
試劑盒應用
該試劑盒適用于新鮮或凍存的抗凝全血基因組DNA提取純化。
純化DNA的應用
血液基因組DNA去試劑盒 純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫構建等實驗。
DNA提取得率和純度
血液基因組DNA提取得率與組織的來源、保存條件、保存時間、用量等因素相關，所得基因組DNA純度均滿足常規(guī)分子生物學實驗操作，其OD260/280在1.7-1.9之間。
試劑盒內容
Buffer DC：裂解血液中的紅細胞。
Buffer BL1：提供樣本酶解環(huán)境。
Foregene Protease Plus：在Buffer BL1的環(huán)境下酶解血液樣本。
Buffer BL2：失活Foregene Protease Plus，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質、RNA等雜質。
Buffer WB1：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特異吸附裂解產物中的基因組DNA。
產品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | 40-50 min (24個樣品) |
離心機 | 臺式離心機 | 樣本酶解物分離 | 離心分離 |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
洗脫體積 | 100-200 μL | 血液樣本處理量 | 50-1000 μL |
操作流程
說明書
產品文獻
MSDS
COA
提取過程中無法獲得基因組DNA
Answer
通常有多種因素會影響基因組DNA產量，包括血液樣本來源、血液抗凝劑、血液保存、操作等。
1. 使用凝血組織提取DNA
建議：提取血液基因組DNA，請采用新鮮血液或保存的抗凝血液(最好使用EDTA作為抗凝劑)。
2. 血液用量過少可能導致提取不到相應的基因組DNA。
建議：對于哺乳動物的血液，建議使用100μL以上抗凝血液血液；禽類等的血液建議采用5μl以上抗凝血液。
3. Foregene Protease Plus保存不當，導致其活性降低或失活。
建議：確認Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的Foregene Protease Plus進行酶解反應。
4. 試劑盒保存不當或存放時間太長，導致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購置新的Blood DNA Mini Kit提取試劑盒進行相關操作。
5. Buffer WB1沒有添加無水乙醇。
建議：確認Buffer WB1中添加正確體積的無水乙醇。
6. 洗脫液沒有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將65℃預熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產量基因組DNA
Answer
1. 血液保存不當或保存時間太長，導致基因組DNA降解。
建議：盡量使用新近采集血液進行基因組DNA的提取。
2. 樣本用量過少，提取到的基因組DNA含量會較少。
建議：哺乳類動物的血液中含基因組DNA的細胞較少，若需更多的基因組DNA，建議使用100μl以上的抗凝血進行基因組DNA提取。
3. 肝素抗凝血液沒有進行Buffer DC處理。
建議：肝素本身會對DNA的提取有影響，在進行肝素抗凝血基因組DNA提取時，請務必按操作說明進行Buffer DC預處理。
4. Foregene Protease Plus保存不當，導致其活性降低或失活。
建議：確認Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的Foregene Protease Plus進行酶解反應。
5. 洗脫液問題。
建議：請使用Buffer EB進行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
6. 洗脫液沒有正確滴加。
建議：請將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
7. 洗脫液體積太少。
建議：請按說明書上要求使用洗脫液進行基因組DNA洗脫，最少不要低于100μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會導致下游實驗的失敗或效果不理想，如：酶切不開，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒有使用正確的離心轉速。
建議：在上清液過柱時盡量保證上清液中無沉淀；務必按說明書進行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質離子污染。
分析：省略了Buffer WB1洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導致殘留的離子污染。
建議：務必按說明書使用Buffer WB1洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；BufferPW洗滌操作不正確，導致RNA酶殘留，影響下游RNA實驗操作，如：體外轉錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無需額外添加RNA酶即可去除RNA，Blood DNA Mini Kit里面所有試劑均無需添加RNA酶；務必按說明書進行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇殘留。
分析：Buffer WB1洗滌純化柱后，沒有進行空管離心操作。
建議：按說明書進行正確的空管離心操作。
