產(chǎn) 品 名 稱 | 血液基因組DNA中量提取試劑盒(1-5mL) Blood DNA midi Kit |
貨 號 | DE-05121 |
規(guī) 格 | 50T |
價 格 | ￥557.00 |
描 述 | 快速從抗凝全血樣本中純化獲得高質(zhì)量的基因組DNA，試劑盒包含Foregene純化柱及試劑。 |
產(chǎn)品介紹
由于血液樣本中含有大量的紅細(xì)胞以及血小板細(xì)胞等，使得血液的處理比較麻煩，而一般方法提取到的血液基因組DNA純度不高，含量太低。本試劑盒采用全新的Foregene Protease Plus以及獨特的BL1、BL2緩沖體系，可以在短時間內(nèi)完全消化抗凝血液和凝血樣本，從而最大程度上避免了DNA的降解以及獲得最大量的基因組DNA?？焖俚难禾幚硐到y(tǒng)，簡便的離心柱操作，大大簡化了血液基因組的提取，使得40min內(nèi)即可得到高質(zhì)量、高純度的基因組DNA。
本試劑盒離心柱采用的DNA-only硅膠膜為本公司特有新型材料，高效、特異吸附DNA，可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及細(xì)胞中其他有機化合物。獲得的DNA片段大，純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠，一個離心柱的最大承載量為80 μg DNA。獲得的DNA可用于酶切、PCR、Southern雜交、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)實驗。
試劑盒應(yīng)用
該試劑盒適用于新鮮或凍存的抗凝全血基因組DNA提取純化。
純化DNA的應(yīng)用
血液基因組DNA去試劑盒 純化獲得的基因組DNA純度高，可用于常規(guī)分子生物學(xué)操作，如：酶切、PCR、Southern雜交、文庫構(gòu)建等實驗。
DNA提取得率和純度
血液基因組DNA提取得率與組織的來源、保存條件、保存時間、用量等因素相關(guān)，所得基因組DNA純度均滿足常規(guī)分子生物學(xué)實驗操作，其OD260/280在1.7-1.9之間。
試劑盒內(nèi)容
Buffer DC：裂解血液中的紅細(xì)胞。
Buffer BL1：提供樣本酶解環(huán)境。
Foregene Protease Plus：在Buffer BL1的環(huán)境下酶解血液樣本。
Buffer BL2：失活Foregene Protease Plus，并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW：去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB1：去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB：洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-Only Column：特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | 40-50 min (24個樣品) |
離心機 | 臺式離心機 | 樣本酶解物分離 | 離心分離 |
離心柱液體盛裝量 | 800 μL | 純化柱DNA承載量 | 80 μg |
洗脫體積 | 100-200 μL | 血液樣本處理量 | 1-5 mL |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻(xiàn)
MSDS
COA
提取過程中無法獲得基因組DNA
Answer
1. 使用凝血組織提取DNA。
建議：提取血液基因組DNA，請采用新鮮血液或保存的抗凝血液(最好使用EDTA作為抗凝劑)。
2. 血液用量過少可能導(dǎo)致提取不到相應(yīng)的基因組DNA。
建議：對于哺乳動物的血液，建議使用1000 μL以上抗凝血液血液；禽類等的血液建議采用50 μL以上抗凝血液。
3. ForegeneProtease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的Foregene Protease Plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
4. 試劑盒保存不當(dāng)或存放時間太長，導(dǎo)致試劑盒里面某些組分失效。
建議：購置新的Blood DNA Midi Kit提取試劑盒進(jìn)行相關(guān)操作。
5. Buffer WB1沒有添加無水乙醇。
建議：確認(rèn)Buffer WB1中添加正確體積的無水乙醇。
6. 洗脫液沒有正確滴加到硅膠膜上。
建議：將65℃預(yù)熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 血液保存不當(dāng)或保存時間太長，導(dǎo)致基因組DNA降解。
建議：盡量使用新近采集血液進(jìn)行基因組DNA的提取。
2. 樣本用量過少，提取到的基因組DNA含量會較少。
建議：哺乳類動物的血液中含基因組DNA的細(xì)胞較少，若需更多的基因組DNA，建議使用1000μl以上的抗凝血進(jìn)行基因組DNA提取。
3. 肝素抗凝血液沒有進(jìn)行Buffer DC處理。
建議：肝素本身會對DNA的提取有影響，在進(jìn)行肝素抗凝血基因組DNA提取時，請務(wù)必按操作說明進(jìn)行Buffer DC預(yù)處理。
4. ForegeneProtease Plus保存不當(dāng)，導(dǎo)致其活性降低或失活。
建議：確認(rèn)Foregene Protease Plus保存條件或者更換新的ForegeneProtease Plus進(jìn)行酶解反應(yīng)。
5. 洗脫液問題。
建議：請使用Buffer EB進(jìn)行洗脫；如果使用ddH2O或其他洗脫液，確認(rèn)洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
6. 洗脫液沒有正確滴加。
建議：請將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間，并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
7. 洗脫液體積太少。
建議：請按說明書上要求使用洗脫液進(jìn)行基因組DNA洗脫，最少不要低于100 μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會導(dǎo)致下游實驗的失敗或效果不理想，如：酶切不開，PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析：沒有使用Buffer PW洗滌純化柱；Buffer PW洗滌純化柱沒有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議：在上清液過柱時盡量保證上清液中無沉淀；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析：省略了Buffer WB1洗滌純化柱或者只洗滌了一次，導(dǎo)致殘留的離子污染。
建議：務(wù)必按說明書使用Buffer WB1洗滌2次，以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析：Buffer中添加了外源的RNA酶；BufferPW洗滌操作不正確，導(dǎo)致RNA酶殘留，影響下游RNA實驗操作，如：體外轉(zhuǎn)錄等。
建議：Foregene系列核酸提取試劑盒無需額外添加RNA酶即可去除RNA，Blood DNA Midi Kit里面所有試劑均無需添加RNA酶；務(wù)必按說明書進(jìn)行Buffer PW洗滌純化柱，并且此步驟不能省略。
4. 乙醇?xì)埩簟?/span>
分析：Buffer WB1洗滌純化柱后，沒有進(jìn)行空管離心操作。
建議：按說明書進(jìn)行正確的空管離心操作。
