產(chǎn) 品 名 稱 | 病毒DNA/RNA共提試劑盒 Viral DNA&RNA Isolation Kit | |
貨 號(hào) | DR-01011 | DR-01013 |
規(guī) 格 | 50T | 200T |
價(jià) 格 | ¥1,010.00 | ¥3,372.00 |
描 述 | 快速從血漿、血清、無細(xì)胞體液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣品中高效率分離純化病毒的DNA或RNA |
產(chǎn)品介紹
該試劑盒采用本公司研制的離心柱和配方,可以從血漿、血清、無細(xì)胞體液和細(xì)胞培 養(yǎng)上清液等樣品中高效率分離純化病毒的 DNA 和 RNA。試劑盒特別了 Linear Acrylamide,可以從體系中輕松捕獲微量 DNA 和 RNA,具有方便快捷、產(chǎn)量高、重復(fù) 性好的特點(diǎn)。DNA/RNA Column 能高效的結(jié)合 DNA 和 RNA,搭配獨(dú)特的配方,可以 同時(shí)處理大量樣品。
全體系 RNase-Free,使得純化得到的病毒核酸無降解;Buffer RW1、Buffer RW2 緩 沖液洗滌體系,使得獲得的病毒核酸無蛋白、核酸酶或其它雜質(zhì)的污染,可直接用于下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
試劑盒應(yīng)用
適用于血漿、血清、無細(xì)胞體液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣品中病毒核酸提取純化。
病毒核酸的應(yīng)用
Viral DNA/RNA Isolation Kit 純化得到的病毒 DNA 和 RNA 可用于各種下游分子實(shí)驗(yàn), 例如: Real Time PCR、RT-PCR、RT-qPCR、分子克隆等。
核酸的儲(chǔ)存
建議使用 RNase-Free ddH2O 洗脫核酸,即時(shí)用于下游實(shí)驗(yàn)或儲(chǔ)存于-80℃。在-80℃ 存儲(chǔ)條件下,核酸可保存一年。
試劑盒組分信息
Linear Acrylamide:降低純化柱的本底吸附,捕獲體系中的微量核酸。
Buffer DRL:提供樣本裂解所需的環(huán)境以及過柱環(huán)境。
Buffer RW1:去除核酸中的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。
Buffer RW2:去除核酸中殘留的鹽離子。
RNase-Free ddH2O:洗脫純化柱膜上的核酸。
DNA/RNA Column:高效吸附核酸。
產(chǎn)品信息
型號(hào) | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個(gè)樣品 | 制備時(shí)間 | ~20min(24個(gè)樣品) |
離心機(jī) | 臺(tái)式離心機(jī) | 離心柱液體盛裝量 | 800μl |
純化柱核酸承載量 | 20μg | 樣品處理量 | ≤200μl |
洗脫體積 | 30-50μl |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻(xiàn)
MSDS
COA
純化獲得的核酸影響下游實(shí)驗(yàn)
Answer
經(jīng)純化柱純化的DNA和RNA,如果鹽離子、蛋白質(zhì)含量過多會(huì)影響下游實(shí)驗(yàn),比如:PCR擴(kuò)增,逆轉(zhuǎn)錄等。
1. 洗脫后的DNA和RNA有鹽離子殘留。
建議:確認(rèn)Buffer RW2中添加了正確體積的無水乙醇,并按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行2次純化柱洗滌;如果還有鹽離子殘留,可在純化柱加入Buffer RW2后,室溫放置5min,再進(jìn)行離心操作,以最大程度上去除鹽離子污染。
2. 洗脫后的DNA和RNA有乙醇?xì)埩簟?/span>
建議:確認(rèn)Buffer RW2洗滌后,按操作說明的離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行空管離心操作;如果還有乙醇?xì)埩?,可以在空管離心后再室溫放置5min,以最大程度上去除乙醇?xì)埩簟?/span>
純化獲得的核酸有降解
Answer
純化得到的核酸的質(zhì)量和樣品的保存、RNase污染、操作等因素有關(guān)。
常見原因分析:
1. 采集樣品沒有及時(shí)保存。
建議:樣品在采集后若不及時(shí)使用,請(qǐng)立即低溫保存于-80℃中。提取RNA請(qǐng)盡量使用新近采集的樣品。
2. 采集樣品反復(fù)凍融。
建議:采集樣品保存過程中要避免凍融(不超過一次),否則會(huì)導(dǎo)致核酸得率降低。
3. 操作間有RNase引入或沒有佩戴一次性手套、口罩等。
建議:RNA提取實(shí)驗(yàn)最好在單獨(dú)的RNA操作間進(jìn)行,并在實(shí)驗(yàn)前清理好實(shí)驗(yàn)桌,實(shí)驗(yàn)時(shí)佩戴一次性手套、口罩,最大程度上避免RNase引入導(dǎo)致的RNA降解。
4. 試劑在使用過程中被RNase污染。
建議:更換新的Viral DNA/RNA Isolation Kit進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
5. RNA操作時(shí)所用的離心管、槍頭等有RNase污染。
建議:確認(rèn)RNA提取時(shí)所用到的離心管、槍頭、移液器等都是RNase-Free。
提取不到核酸或者核酸產(chǎn)量低
Answer
通常會(huì)有多種因素影響回收效率,比如:樣本核酸含量、操作方法、洗脫體積等。
常見原因分析:
1. 樣品保存不當(dāng)或樣本保存時(shí)間過久。
建議:樣本保存于-80℃中,并避免反復(fù)凍融使用;盡量采用新鮮采集樣品進(jìn)行核酸提取操作。
2. 樣品裂解不充分。
建議:請(qǐng)保證樣品和裂解工作液徹底混勻,并且在室溫(15-25℃)孵育10min。
3. 洗脫液添加不正確。
建議:確認(rèn)RNase-Free ddH2O滴加到了純化柱膜中間位置,切勿滴加到純化柱壓圈上。
4. Buffer RW2中沒有添加正確體積的無水乙醇。
建議:請(qǐng)按照說明書,在試劑盒使用前,在Buffer RW2中添加正確體積的無水乙醇并混勻。
5. 樣品用量不合適。
建議:每500μl Buffer DRL處理樣品量200μl,樣品處理量過多會(huì)導(dǎo)致核酸提取量降低。
6. 洗脫體積不合適或洗脫不徹底。
建議:純化柱的洗脫液體積為30-50μl;若洗脫效果并不理想,建議在加入預(yù)熱的RNase-Free ddH2O后,延長室溫放置的時(shí)間,例如放置5-10min。
7. 純化柱在Buffer RW2洗滌之后有乙醇?xì)埩簟?/span>
建議:如果在Buffer RW2洗滌,空管離心2min后還有乙醇?xì)埩?/span>,可以在空管離心后將純化柱置于室溫5min,以充分除去殘留乙醇。