產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨(dú)特的裂解緩沖體系可以快速的從培養(yǎng)細(xì)胞樣本中釋放出RNA，用于RT-qPCR反應(yīng)，消除了費(fèi)時(shí)費(fèi)力的RNA純化過(guò)程，只需7min即可得到所需要的RNA模板，配合試劑盒提供的5× Direct RT Mix 、2× Direct qPCR Mix-Taqman能夠快速有效的得到實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果。

5× Direct RT Mix 和2× Direct qPCR Mix-Taqman 具有很強(qiáng)的抑制物耐受性，能以待測(cè)樣本的裂解液為模板，進(jìn)行高效逆轉(zhuǎn)和特異性擴(kuò)增。該試劑包含福際高RNA親和性Foregene Reverse Transcriptase、Hot D-TaqDNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR優(yōu)化劑和穩(wěn)定劑，與裂解緩沖液配合使用能夠快速簡(jiǎn)便地對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，并具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。

試劑盒應(yīng)用

適用范圍：培養(yǎng)細(xì)胞。

樣本裂解釋放的RNA：僅適用于本試劑盒的RT-qPCR模板。

試劑盒可用于以下用途：基因調(diào)控表達(dá)分析、等位基因檢測(cè)、藥物篩查等。

試劑盒局限性

擴(kuò)增片段≤300bp。

試劑盒用于新鮮培養(yǎng)細(xì)胞。

試劑盒內(nèi)容

Part I

Buffer CL：提供細(xì)胞裂解反應(yīng)所需環(huán)境。

Buffer ST：終止裂解液中的活性物質(zhì)，避免對(duì)后續(xù)RT造成影響。

Foregene Protease Plus II：在裂解緩沖液的環(huán)境下，裂解細(xì)胞，釋放核酸。

Part II

DNA Eraser：DNA 去除劑，去除基因組對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響。

5× Direct RT Mix：包含福際生物專門(mén)研制的高RNA親和性Foregene Reverse Transcriptase，以及RNase Inhibitor、dNTPs、穩(wěn)定劑、增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑及優(yōu)化配比的逆轉(zhuǎn)錄引物(Random Primer、Oligo(dT)₁₈ Primer)。

2× Direct qPCR Mix-Taqman：該試劑包含福際生物Hot D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR優(yōu)化劑和穩(wěn)定劑。

ROX Reference Dye：一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整PCR加樣誤差所引起的 PCR管與管之間的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye濃度不同，用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。

RNase-Free ddH₂O：無(wú)RNase滅菌超純水，用于兩步法RT-qPCR反應(yīng)。

儲(chǔ)存條件

全程低溫冰盒運(yùn)輸，保證試劑盒Part I、Part II處于＜4℃狀態(tài)。

本試劑盒Part I保存在2-8℃；Part II保存在-20℃。

v  Foregene Protease Plus II應(yīng)置于4℃保存，切勿凍存于-20℃。

v  試劑2× Direct qPCR Mix-Taqman保存于-20°C；若頻繁使用，也可置于 4°C短期保存(限 10 天內(nèi)用完)。