產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨特的裂解緩沖液體系可以快速的從斑馬魚等淡水魚類組織、尾鰭或魚卵樣本中釋放出基因組DNA，用于PCR反應(yīng)，因此特別適合大規(guī)?；驒z測。

裂解緩沖液釋放基因組DNA過程在65℃條件下10-30 min內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA等的過程，即可將釋放出的微量DNA作為模板進行PCR反應(yīng)。

2× PCR Easy^TM Mix具有很強的PCR反應(yīng)抑制物耐受性，能以待測樣本的裂解液為模板，進行高效特異性擴增。該試劑包含Foregene D-Taq DNAPolymerase、dNTPs、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR優(yōu)化劑和穩(wěn)定劑。與裂解緩沖液配合使用能夠快速簡便地對樣品進行檢測，并具有靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等特點。

2× PCR Easy^TM Mix(UNG)在2× PCR Easy^TM Mix的基礎(chǔ)上用dUTP替代了dTTP，并同時加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反應(yīng)前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，UNG酶對不含有尿嘧啶的模板不會造成任何影響，從而保證擴增的特異性和準確性，防止了大規(guī)模基因檢測時可能出現(xiàn)的PCR產(chǎn)物污染問題。

D-Taq DNA polymerase是Foregene為直接PCR反應(yīng)專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase對多種PCR反應(yīng)抑制劑具有極強的的耐受性、在各種復雜反應(yīng)體系中均能高效擴增痕量的DNA，擴增速度可達2Kb/min，特別適合進行直接PCR反應(yīng)。

試劑盒應(yīng)用

適用范圍：斑馬魚等淡水魚類。

樣本裂解釋放的DNA：僅用作PCR模板。

試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因型鑒定、動物基因分型等。

試劑盒局限性

擴增片段≤1kb；超過1kb，擴增效率下降或者擴增失敗。

UNG防PCR產(chǎn)物污染體系得到的PCR產(chǎn)物請勿用于基因克隆或測序。

PCR產(chǎn)物3’末端隨機加A尾。

試劑盒內(nèi)容

Buffer FP：提供斑馬魚組織裂解反應(yīng)所需的環(huán)境。

Foregene Protease：在裂解緩沖液的環(huán)境下，裂解斑馬魚組織，釋放基因組DNA。

2× PCR Easy^TM Mix(UNG)：在2× PCR Easy^TM Mix的基礎(chǔ)上用dUTP替代了dTTP，并同時加入能夠降解含有dUTP模板的UNG酶，從而能夠有效防止PCR擴增產(chǎn)物污染。包含福際生物特別改造的D-Taq DNA Polymerase、UDG、dNTPs、MgCl₂、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR反應(yīng)時，只需將適當?shù)牧呀饣旌弦?、引物?/span>ddH₂O添加到2× PCR Easy^TM Mix(UNG)中即可用于PCR反應(yīng)。

6× DNA Loading Buffer：該Loading Buffer中不含有SDS。建議在進行瓊脂糖凝膠電泳時，配搭使用試劑盒附贈的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結(jié)果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否則在電泳時會在泳道中有一大團拖尾亮光，影響實驗結(jié)果。

儲存條件

全程低溫冰盒運輸，保證試劑盒Part I、Part II處于＜4℃狀態(tài)。

本試劑盒Part I保存在2-8℃。

v 試劑Buffer FP，在干燥條件下，可保存12個月；如需保存更長時間可置于2–8℃。

v  試劑Foregene Protease，具有獨特配方，為保證其活性和穩(wěn)定性，請保存于4℃，保存時間為12個月。

v  試劑6× DNA Loading Buffer，可置于4℃或-20℃長期保存。

本試劑盒Part II保存在-20℃。

v  試劑2× PCR Easy^TM Mix(UNG)，在-20℃條件下可保存12個月；若頻繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天內(nèi)用完)。

操作流程