無RNA酶污染:試劑盒提供的DNA-Only Column使得實驗過程中無需額外添加RNA酶即可去除基因組DNA中的RNA,避免實驗室遭受外源RNA酶污染。
速度快:Foregene Protease具有比同類蛋白酶更高的活性,消化組織樣本速度快;操作簡單,基因組DNA提取操作在20-80分鐘內(nèi)即可完成。
方 便:離心操作均在常溫,無需4℃低溫離心或乙醇沉淀DNA。
安 全:無需有機試劑抽提。
質(zhì)量高:提取獲得的基因組DNA片段大、無RNA、無RNA酶、離子含量極低,能滿足各種實驗的要求。
微量洗脫體系:可以提高基因組DNA濃度,便于下游檢測或?qū)嶒灐?/p>
產(chǎn) 品 名 稱 | 微量基因組DNA提取試劑盒 Genomic DNA micro Kit |
貨 號 | DM-01011 |
規(guī) 格 | 50T |
價 格 | ¥557.00 |
描 述 | 快速從微量樣本中純化獲得高質(zhì)量的基因組DNA。 |
產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的DNA-Only Column、全新的Foregene Protease以及獨特的緩沖液體系,可以在20-80分鐘內(nèi)高效從各種微量生物樣本中,例如:微量血液、細胞、動物組織、干燥血跡、臨床棉簽、毛囊等,純化得到到較高濃度、高質(zhì)量的基因組DNA。
離心柱中采用的DNA-Only硅膠膜為本公司特有新型材料,高效、專一吸附DNA,可最大限度的去除RNA、雜質(zhì)蛋白、離子及細胞中其他有機化合物。專門設計的微小純化柱結(jié)合基因組DNA,可用微量(15μL)洗脫液洗脫DNA,提高獲得的基因組DNA的濃度,便于下游檢測或?qū)嶒灐?/span>
試劑盒應用
該試劑盒適用于純化以下樣本基因組DNA:新鮮或凍存的動物組織、新鮮或抗凝凍存的微量全血、干血斑、培養(yǎng)的細胞、微量切片組織、毛囊、漱口水等。
純化DNA的應用
微量基因組DNA提取試劑盒純化獲得的基因組DNA純度高,可用于常規(guī)分子生物學操作,如:酶切、PCR、Southern雜交、文庫構(gòu)建等實驗。
DNA提取得率和純度
動物組織基因組DNA提取得率與組織的來源、保存條件、保存時間、用量等因素相關(guān),所得基因組DNA純度均滿足常規(guī)分子生物學實驗操作,其OD260/280在1.7-1.9之間。
試劑盒內(nèi)容
Buffer ST1:提供樣本酶解環(huán)境。
Foregene Protease:在Buffer ST1的環(huán)境下酶解組織樣本。
Buffer ST2:失活Foregene Protease,并提供DNA上柱環(huán)境。
Buffer PW:去除DNA中的蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì)。
Buffer WB:去除DNA中的殘留的鹽離子。
Buffer EB:洗脫純化柱膜上的DNA。
DNA-only Column:特異吸附裂解產(chǎn)物中的基因組DNA。
產(chǎn)品信息
型號 | 離心柱型 | 純化組件 | Foregene離心柱、試劑 |
通量 | 1-24個樣品 | 制備時間 | 20-80 min(24個樣本) |
離心機 | 臺式離心機 | 組織酶解物分離 | 離心分離 |
純化柱DNA承載量 | 40 μg | 離心柱液體盛裝量 | 800 μL |
洗脫體積 | 15-100 μL | 組織樣本處理量 | 5mg組織或微量樣本 |
操作流程
說明書
產(chǎn)品文獻
MSDS
COA
取過程中無法獲得基因組DNA
Answer
通常有多種因素會影響基因組DNA產(chǎn)量,包括樣本來源、樣本保存條件、樣本的預處理、操作等。
1. 組織樣本保存不當或保存時間太長,導致基因組DNA已經(jīng)降解。
建議:組織樣本保存于液氮或者-80℃;用甲醛等溶液固定組織時應盡量縮短從樣品采集到置于固定液之間的時間;盡量使用新近采集組織樣本進行基因組DNA的提取。
2. 組織用量過少可能導致提取不到相應的基因組DNA。
建議:對于保存時間很長或基因組DNA降解比較厲害的組織樣本,可以適當增加組織樣本的用量,以便提取獲得可觀的基因組DNA??梢愿鶕?jù)DNA需要確定樣本的用量,但是不宜超過10mg。
3. Foregene Protease保存不當,導致其活性降低或失活。
建議:確認Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進行酶解反應。
4. 試劑盒保存不當或存放時間太長,導致試劑盒里面某些組分失效。
建議:購置新的通用型基因組DNA提取試劑盒進行相關(guān)操作。
5. 試劑盒使用不當。
建議:請確認使用的試劑盒為Genomic DNA Micro Kit。
6. Buffer WB沒有添加無水乙醇。
建議:確認Buffer WB中添加正確體積的無水乙醇。
7. 洗脫液沒有正確滴加到硅膠膜上。
建議:將65℃預熱的洗脫液滴加到硅膠膜的正中間,并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
提取獲得低產(chǎn)量基因組DNA
Answer
1. 樣本保存不當或保存時間太長,導致基因組DNA降解。
建議:組織樣本保存于液氮或者-80℃;用甲醛等溶液固定組織時應盡量縮短從樣品采集到置于固定液之間的時間;盡量使用新近采集組織樣本進行基因組DNA的提取。
2. 組織樣本用量過少,提取到的基因組DNA含量會較少。
建議:對于保存時間過長或基因組DNA降解比較厲害的組織樣本,可以適當增加組織樣本的用量,以便提取獲得可觀的基因組DNA。可以根據(jù)DNA需要確定樣本的用量,但是不宜超過10mg。
3. Foregene Protease保存不當,導致其活性降低或失活。
建議:確認Foregene Protease保存條件或者更換新的Foregene Protease進行酶解反應。
4. 洗脫液問題。
建議:請使用Buffer EB進行洗脫;如果使用ddH2O或其他洗脫液,確認洗脫液的pH值在7.0-8.5之間。
5. 洗脫液沒有正確滴加。
建議:請將洗脫液滴加到硅膠膜的正中間,并在室溫放置5分鐘增加洗脫效率。
6. 洗脫液體積太少。
建議:請按說明書上要求使用洗脫液進行基因組DNA洗脫,最少不要低于15μL。
提取獲得基因組DNA純度低
Answer
基因組DNA純度低會導致下游實驗的失敗或效果不理想,如:酶切不開,PCR得不到目的基因片段等。
1. 雜蛋白污染、RNA污染。
分析:沒有使用Buffer PW洗滌純化柱;Buffer PW洗滌純化柱沒有使用正確的離心轉(zhuǎn)速。
建議:在上清液過柱時盡量保證上清液中無沉淀;務必按說明書進行Buffer PW洗滌純化柱,并且此步驟不能省略。
2. 雜質(zhì)離子污染。
分析:省略了Buffer WB洗滌純化柱或者只洗滌了一次,導致殘留的離子污染。
建議:務必按說明書使用Buffer WB洗滌2次,以盡量去除殘留的離子。
3. RNA酶污染。
分析:Buffer中添加了外源的RNA酶;Buffer PW洗滌操作不正確,導致RNA酶殘留,影響下游RNA實驗操作,如:體外轉(zhuǎn)錄等。
建議:Foregene系列核酸提取試劑盒無需額外添加RNA酶即可去除RNA,Genomic DNA Micro Kit里面所有試劑均無需添加RNA酶;務必按說明書進行Buffer PW洗滌純化柱,并且此步驟不能省略。
4. 乙醇殘留。
分析:Buffer WB洗滌純化柱后,沒有進行空管離心操作。
建議:按說明書進行正確的空管離心操作。
5. 其他雜質(zhì)污染。
分析:保存樣本或特殊樣本沒有進行預處理。
建議:按操作說明對樣本進行徹底的預處理。